DB34T 3987-2021 禽白血病病毒细胞培养分离检测技术规程

DB34/T 3987-2021《禽白血病病毒细胞培养分离检测技术规程》是安徽省地方标准，用于指导禽白血病病毒的分离与检测工作。以下是对该标准中一些关键条款的详细解读：

样品采集

标准明确指出样品应从疑似感染禽类中采集，包括血液、组织样本等。强调了样本采集的时间和部位对检测结果的重要性，要求在发病初期或症状明显时采集，以提高病毒检出率。

细胞培养

在细胞培养环节，标准规定使用特定类型的细胞系如DF-1细胞，这些细胞系对禽白血病病毒敏感。此外，还详细描述了细胞培养基的选择、培养条件（如温度、CO2浓度）以及传代次数限制，确保细胞处于最佳状态以便于病毒的生长繁殖。

病毒分离

关于病毒分离部分，标准提供了详细的步骤说明，包括初次接种、观察细胞病变效应(CPE)、多次传代直至出现稳定CPE等过程。同时强调了无菌操作的重要性，并且对于疑似阳性样品需要进行对照实验来排除非特异性反应。

检测方法

标准推荐采用PCR技术作为主要检测手段之一，具体操作流程涵盖了核酸提取、扩增反应体系配置、循环参数设定等内容。另外还提到可以通过免疫荧光试验(IFA)进一步确认结果，特别是当PCR结果为阴性但临床表现强烈怀疑时。

结果判定

最后，在结果判定上，标准给出了明确的标准：如果在细胞培养过程中观察到典型的CPE，并且通过PCR或IFA验证存在目标基因序列，则可判定为阳性；反之则为阴性。同时提醒实验室工作人员注意区分假阳性与假阴性的可能性，必要时需重复实验以保证准确性。

以上是对DB34/T 3987-2021《禽白血病病毒细胞培养分离检测技术规程》中几个核心内容的深入解析，希望对你有所帮助。