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摘要:本文件规定了土壤微生物胞外酶活性测定的荧光法原理、试剂与材料、仪器设备、样品处理、测定步骤、数据处理和结果表示。本文件适用于农田土壤、森林土壤及其他类型土壤中微生物胞外酶活性的测定。
Title:Determination of Soil Microbial Extracellular Enzyme Activity - Fluorescence Method
中国标准分类号:B31
国际标准分类号:07.100.10
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拓展解读
土壤微生物胞外酶活性是反映土壤生态系统功能的重要指标。在TJAASS 144-2024《土壤微生物胞外酶活性测定 荧光法》中,与旧版相比,关于荧光底物的选择和使用方法有显著改进。以β-葡萄糖苷酶为例,新版标准明确了使用4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷(MUG)作为检测底物的具体操作细节。
在应用过程中,首先需制备浓度为50 μmol/L的标准溶液,并用pH7.6磷酸盐缓冲液稀释至适当浓度。取2 mL样品提取液加入96孔板中,随后添加100 μL MUG溶液,在37℃恒温条件下避光反应30分钟。反应结束后立即加入200 μL 0.5 mol/L NaOH终止反应,使用荧光分光光度计测定激发波长365 nm、发射波长450 nm下的荧光强度。
这种改进不仅提高了检测灵敏度,还增强了数据的可比性和重复性,为研究土壤碳氮循环提供了更可靠的技术支持。通过严格控制反应条件和标准化操作流程,可以确保结果准确反映土壤微生物代谢活力的真实水平。