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摘要:本文件规定了鸭巴泰病毒RT-PCR检测的样品采集、RNA提取、RT-PCR反应体系及条件、结果分析等内容。本文件适用于鸭巴泰病毒的实验室检测和诊断。
Title:Detection method of Duck Tembusu Virus by RT-PCR
中国标准分类号:C46
国际标准分类号:11.020
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拓展解读
福建省地方标准《鸭巴泰病毒RT-PCR检测方法》(DB35/T 1958-2021)于2021年正式发布实施,该标准为鸭巴泰病毒的快速检测提供了科学依据。以下对标准中一些关键条款进行详细解读:
在标准的范围部分明确规定了本标准适用于鸭巴泰病毒的检测,这表明该标准仅限于特定病原体的诊断使用,不适用于其他类型的病毒检测。
标准的术语和定义部分给出了“鸭巴泰病毒”、“RT-PCR”等专业术语的准确含义。“RT-PCR”是指将逆转录与聚合酶链式反应相结合的技术用于核酸扩增,确保了检测方法的专业性和准确性。
样品采集部分强调了样品应来源于疑似感染鸭群,且采集部位需包括泄殖腔拭子和喉拭子。这一要求保证了样本的全面性和代表性,有助于提高检测结果的可靠性。
样品处理部分指出,样品应在4℃条件下保存并在24小时内完成检测。若不能及时检测,则需要将其冷冻保存至-70℃。此规定旨在减少外界环境因素对样品质量的影响,保持病毒核酸的完整性。
试剂准备部分要求使用经过验证的试剂盒,并严格按照说明书操作。同时,还应设立阴性对照、阳性对照及空白对照,以确保实验过程中的准确性和可比性。
在检测步骤中提到,首先进行RNA提取,然后进行RT-PCR扩增。扩增产物需通过琼脂糖凝胶电泳进行分析,观察是否有特异性条带出现。这一流程确保了检测结果的真实可靠。
结果判断部分明确指出,当出现预期大小的特异性条带时,即可判定为阳性。如果未出现或条带模糊不清,则视为阴性。此外,还需结合临床症状和其他实验室检查结果综合判断。
标准最后还附有详细的记录表格模板,要求记录每次检测的具体信息如日期、天气情况、操作人员姓名等,以便追溯和验证检测过程。
综上所述,《鸭巴泰病毒RT-PCR检测方法》(DB35/T 1958-2021)从样品采集到结果判定都制定了严格的操作规范,为基层兽医工作者提供了一个标准化、规范化的检测方案,对于防控鸭巴泰病毒感染具有重要意义。