DB4403T 122-2020 人源肿瘤细胞系建立技术规范

DB4403T 122-2020《人源肿瘤细胞系建立技术规范》是深圳市地方标准，于2020年发布并实施。该标准对人源肿瘤细胞系的建立流程进行了系统化、规范化的要求，为科研机构和医疗机构提供了权威的技术指导。

以下选取部分重要条文进行详细解读：

5.1 样品采集

样品采集应遵循无菌操作原则，使用合格的一次性采样器具。样本量不少于1ml，包含肿瘤组织或体液成分。此条强调了样品采集的无菌性和数量要求，确保后续实验的可靠性。

5.2 细胞分离

采用机械法或酶消化法进行细胞分离，建议使用胶原酶Ⅰ型。分离后的细胞悬液应立即进行计数和活力检测。这明确了细胞分离的方法选择，并强调了及时检测的重要性。

5.3 培养基选择

推荐使用含10%-20%胎牛血清的DMEM/F12培养基，需在超净工作台内配制。此条对培养基成分和配制环境做出了明确规定，有助于保持培养体系的稳定性。

6.1 细胞冻存

冻存时细胞密度应控制在1×10^6个/ml-5×10^6个/ml之间，使用二甲基亚砜作为冷冻保护剂。此条对冻存细胞的密度和保护剂的选择给出了具体参数，有利于提高冻存成功率。

7.1 鉴定指标

鉴定应包括细胞形态学观察、染色体核型分析、STR基因分型等项目。这确立了细胞系鉴定的基本内容，确保建立的细胞系具有代表性。

这些条文从样品采集到细胞鉴定的各个环节，构建了完整的技术流程，为标准化操作提供了依据。