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摘要:本文件规定了利用DNA分子标记技术对马铃薯品种真实性和种薯纯度进行鉴定的方法和要求。本文件适用于马铃薯品种的真实性和种薯纯度的检测与评价。
Title:Potato Variety Authenticity and Seed Potato Purity Identification - DNA Molecular Markers
中国标准分类号:B 46
国际标准分类号:65.020
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拓展解读
DB5301/T 26-2019 是云南省昆明市制定的地方标准,规定了利用DNA分子标记技术对马铃薯品种真实性及种薯纯度进行鉴定的方法。以下为关键条款的详细解读:
在范围部分,该标准适用于马铃薯品种的真实性验证以及种薯纯度的检测。明确了适用范围。
术语和定义中,给出了核心概念如“DNA分子标记”、“真实性”、“种薯纯度”等的明确定义,为后续操作提供了统一的标准术语基础。
样品采集与处理章节强调了样本来源的重要性,要求样本具有代表性,并详细描述了样本保存、运输条件以确保样本质量。
核酸提取部分规定了使用适合植物组织的试剂盒或方法来提取高质量的DNA,同时指出提取后的DNA应满足浓度不低于50ng/μL且OD260/280值应在1.8~2.0之间。
PCR扩增描述了用于检测的特异性引物设计原则,包括长度一般为15~30bp,GC含量适中,避免发夹结构和引物二聚体形成等。
电泳分析部分指出采用琼脂糖凝胶电泳时,其浓度通常为1.5%~2.0%,电压设置为40V~100V,根据片段大小调整时间,使条带清晰可辨。
结果判定中明确指出,若目标片段出现则判定为阳性,未出现则为阴性。当多个位点均符合预期时,可认定该样品与目标品种一致。
附录A列举了部分常用马铃薯品种的特异性标记信息,包括引物序列及其预期扩增产物长度,供实际操作参考。
附录B提供了马铃薯品种真实性及种薯纯度鉴定报告的基本格式,包括基本信息、实验方法、结果分析等内容框架。
通过以上内容可以看出,该标准从样本准备到最终结果判定都制定了详细的规范,旨在保证鉴定过程的一致性和结果的可靠性,对于保障马铃薯种子质量和农业生产的健康发展具有重要意义。