DB12T 956—2020 奶牛场粪污中总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法

摘要：本文件规定了奶牛场粪污中总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的酶底物法测定原理、试剂和材料、仪器设备、样品处理、测定步骤、结果计算与表示及精密度要求。本文件适用于奶牛场粪污中总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定。
Title：Determination of total coliforms, fecal coliforms and Escherichia coli in dairy farm manure waste - Enzyme substrate method
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：13.060.30

DB12/T 956—2020标准规定了奶牛场粪污中总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的酶底物法测定方法。以下是对该标准的重要条文进行详细解读：

### 样品采集与保存

- **样品采集**：应在奶牛场粪污处理设施的不同位置采集代表性样本，确保采样点能够反映整个粪污状况。

- **样品保存**：采集后的样品应立即置于4℃条件下保存，并在24小时内完成检测。

### 实验材料与试剂

- **培养基**：使用符合GB 4789.3规定的培养基，确保其质量和性能满足检测要求。

- **试剂**：所有试剂需为分析纯或更高纯度，且应在有效期内使用。

### 测定步骤

1. **样品制备**：将采集的粪污样品充分混匀后，取适量样品加入到含有特定稀释液的无菌瓶中，制成适当浓度的悬浮液。

2. **接种**：将制备好的样品悬浮液按照标准要求接种到培养皿中。

3. **培养**：将接种后的培养皿放入36±1℃的恒温培养箱中培养24小时±2小时。

4. **观察与计数**：培养结束后，观察培养皿中的菌落特征，根据酶底物法的反应结果判断并记录菌落数。

### 结果计算

- **菌落总数计算**：根据培养皿上的菌落数目，结合稀释倍数，计算出每克样品中的菌落总数。

- **结果报告**：最终结果以CFU/g的形式表示，保留两位有效数字。

### 注意事项

- 在整个实验过程中，应严格遵守无菌操作规程，防止样品受到污染。

- 每次实验都应对培养基和试剂进行质量检查，确保其符合标准要求。

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