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摘要:本文件规定了猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪丁型冠状病毒的三重实时荧光PCR检测方法,包括样品采集、核酸提取、扩增反应体系及条件、结果分析等内容。本文件适用于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪丁型冠状病毒的实验室检测与诊断。
Title:Triple Real-time Fluorescent PCR Detection for Porcine Epidemic Diarrhea Virus, Transmissible Gastroenteritis Virus, and Porcine Deltacoronavirus
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:65.020.30
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拓展解读
TCVMA 156-2024标准中关于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪丁型冠状病毒的检测方法,有一处重要的更新体现在样本处理步骤上。相较于旧版标准,新版增加了对样本中RNA提取效率的监控要求。
在实际应用中,为了确保检测结果的准确性,操作人员需要严格按照标准中的规定,在RNA提取过程中加入内标物质。具体做法是在样本与裂解液混合前,将已知浓度的内标RNA加入样本中。随后按照相同的提取流程处理样本和内标,通过后续的扩增反应来监测RNA提取效率。
如果内标信号强度低于设定阈值,则表明提取效率可能不足,此时应重新提取RNA直至满足要求。这一措施可以有效避免因样本质量问题导致的假阴性结果,提高检测的可靠性。正确实施这一改进内容,对于保障猪群健康具有重要意义。