DB37T 4047—2020 猪圆环病毒3型聚合酶链式反应检测方法

《猪圆环病毒3型聚合酶链式反应检测方法》（DB37/T 4047—2020）是一项山东省地方标准，用于指导猪圆环病毒3型（PCV3）的PCR检测。这项标准对实验室操作、试剂选择、样本处理和结果分析等方面进行了规范。

标准中明确指出，实验人员需经过专业培训并持证上岗，确保操作准确无误。试剂的选择至关重要，必须使用经验证合格的产品，且应在有效期内使用。对于样本采集，要求采集新鲜组织样本如淋巴结、肺脏等，并立即置于-80℃保存，避免反复冻融影响检测结果。

在核酸提取环节，标准推荐采用商品化的DNA提取试剂盒，严格按照说明书操作，确保提取效率。扩增反应体系的配置需精确，包括引物浓度、dNTPs用量及退火温度等参数均应严格控制。

结果判断部分强调阳性对照和阴性对照的设置。如果阳性对照呈阳性而阴性对照呈阴性，则说明实验体系有效。若样品扩增曲线Ct值小于等于38且熔解曲线符合预期，则判定为阳性。当Ct值大于38时，需重复实验以确认结果。

标准还特别提到，检测过程中应做好质量控制，定期进行仪器校准和性能验证。同时，实验记录要详实完整，便于追溯和复核。