TBPMA 24-2024 生活饮用水中诺如病毒定量检测 实时荧光PCR方法

摘要：本文件规定了生活饮用水中诺如病毒定量检测的实时荧光PCR方法的技术要求、操作步骤和结果判定。本文件适用于生活饮用水中诺如病毒的定量检测。
Title：Quantitative Detection of Norovirus in Drinking Water by Real-time Fluorescent PCR Method
中国标准分类号：C53
国际标准分类号：13.060.30

本文将聚焦于TBPMA 24-2024与旧版标准在样品处理方面的差异，并详细解读新标准中关于核酸提取操作的关键步骤及其应用方法。

在旧版标准中，样品预处理过程较为笼统，仅要求使用通用试剂进行简单提取。而新版标准则明确规定了采用磁珠法进行核酸提取的具体流程：首先，需将250μL水样加入含有1.5mm直径玻璃珠的离心管中，随后加入600μL细胞裂解液，振荡混匀后置于56℃恒温水浴箱中孵育30分钟。接着，加入600μL抑制物去除剂，充分混匀后再次孵育10分钟，最后通过磁珠吸附、洗涤和洗脱等步骤完成核酸提取。

此方法的优点在于能够有效去除PCR抑制物，提高检测灵敏度。实际操作时应注意以下几点：一是确保玻璃珠充分分散，避免结块影响裂解效果；二是控制好各阶段温度和时间，尤其是56℃孵育环节，过短可能导致病毒未完全裂解，过长则可能造成核酸降解；三是选用高质量磁珠和试剂，以保证核酸纯度和提取效率。

通过遵循新版标准中的核酸提取操作规程，可以显著提升生活饮用水中诺如病毒定量检测的准确性和可靠性。这一改进对于保障公众健康具有重要意义。