DB13T 5143-2019 畜禽组织及体液中多种抗生素残留快速检测 微生物抑制法

DB13/T 5143-2019 是河北省地方标准，规定了利用微生物抑制法检测畜禽组织及体液中多种抗生素残留的原理、试剂与材料、仪器设备、样品前处理、操作步骤、结果判断和计算等内容。以下为标准中的关键条款解读：

【范围】

本标准适用于牛、羊、猪、鸡等动物肌肉、肝脏、肾脏、牛奶、鸡蛋等组织和体液中四环素类、磺胺类、喹诺酮类、大环内酯类等抗生素残留的快速检测。

【原理】

微生物抑制法基于抗生素对微生物生长的抑制作用。将待测样品提取液与特定微生物菌悬液混合后接种于培养基上，若样品中含有目标抗生素，则会抑制微生物生长，形成抑菌圈。

【试剂与材料】

所用试剂应符合相关国家标准或行业标准。特别需要注意的是，培养基需根据具体检测项目选择合适配方，并确保无污染。

【仪器设备】

包括但不限于恒温培养箱、紫外灯、分析天平、移液器等。这些设备的精度和性能直接影响检测结果准确性。

【样品前处理】

样品处理是保证检测结果可靠性的关键环节。需要按照规定的方法进行匀浆、离心、过滤等操作，以去除杂质并浓缩目标物质。

【操作步骤】

1. 样品制备：准确称取一定量样品，加入适量提取剂，在一定条件下振荡提取。

2. 提取液净化：通过固相萃取柱或其他方法净化提取液。

3. 接种：将处理好的样品提取液与菌悬液混合均匀后接种到培养基表面。

4. 培养：置于适宜温度下培养一定时间。

5. 结果观察：在紫外灯下观察是否有抑菌圈出现及其大小。

【结果判断】

当出现明显抑菌圈时，表明样品中可能存在该类抗生素残留；反之则未检出。对于定量检测还需结合标准曲线进行浓度估算。

【注意事项】

1. 实验全程应严格遵守无菌操作规程，防止外来污染影响实验结果。

2. 不同种类抗生素对应不同的微生物指示菌，需正确选择。

3. 定期校准仪器设备，确保其处于良好工作状态。

以上内容为核心条款解析，实际应用中还需结合具体情况进行灵活调整。