DB45T 1856-2018 蛤蚧及其伪品COI条形码鉴别技术规程

《DB45T 1856-2018 蛤蚧及其伪品COI条形码鉴别技术规程》是一项专门用于蛤蚧及其伪品鉴定的技术规范。以下选取其中的重要条文进行详细解读：

前言

本标准规定了利用线粒体细胞色素c氧化酶亚基I（COI）基因序列对蛤蚧及其常见伪品进行DNA条形码鉴别的技术流程，包括样品采集、DNA提取、PCR扩增、测序以及数据分析等环节。

范围

本标准适用于蛤蚧及其主要伪品如壁虎属、蜥蜴属等物种的区分与鉴定。

术语和定义

1. 蛤蚧：指大壁虎（Gekko gecko），属于爬行纲有鳞目壁虎科。

2. 伪品：指在外观上与蛤蚧相似但实际为其他种类动物的产品或原料。

3. DNA条形码：利用特定基因区域（如COI基因）的一段短序列作为生物分类学标识符的技术方法。

样品采集

样品应来源于活体或者干燥标本，确保来源合法且信息完整。采集时需注意保护野生动物资源，遵守相关法律法规。

DNA提取

采用适合于小量组织样本的商业化试剂盒进行DNA提取操作，保证提取效率及纯度达到后续实验要求。

PCR扩增

使用特异性引物对COI基因片段进行扩增，反应体系需优化以获得最佳扩增效果。同时设置阳性对照和阴性对照以验证实验可靠性。

测序

通过Sanger双脱氧链终止法或高通量测序平台完成目标片段测序工作，并记录下原始数据以便进一步分析处理。

数据分析

将测得的序列与公共数据库中已知参考序列比对，计算遗传距离并构建系统发育树来确认样本身份归属。若发现异常情况还需结合形态学特征再次核实结果准确性。

以上内容是对该标准中关键部分所做的简要阐述，在实际应用过程中还需根据具体情况灵活调整具体参数设置等方面的内容。希望这些信息能够帮助您更好地理解和掌握这项技术的应用要点。