DB32T 3681-2019 小麦产毒镰刀菌种群分子分型技术规范

《小麦产毒镰刀菌种群分子分型技术规范》（DB32/T 3681-2019）是江苏省针对小麦生产中镰刀菌污染问题制定的一项地方标准。该标准主要规定了小麦产毒镰刀菌种群的分子分型方法，包括样品采集、DNA提取、PCR扩增及数据分析等环节的技术要求。

标准中特别强调了样品采集的重要性。在田间调查时，应选择具有代表性的地块，并在不同生育期采集样本。样品需保持新鲜并尽快送至实验室处理。对于DNA提取，推荐使用CTAB法或商业化试剂盒，以确保获得高质量的基因组DNA。

PCR扩增部分详细描述了引物设计原则和反应体系组成。引物序列应覆盖目标区域且特异性良好，避免非特异性扩增。反应体系中各成分浓度需精确控制，退火温度的选择直接影响扩增效果。此外，标准还提出了内参对照的设置，用于判断实验结果的有效性。

数据分析章节指出，应采用聚类分析软件对电泳图谱或测序数据进行处理，构建指纹图谱。通过比较不同分离株间的相似度，可有效区分不同类型的镰刀菌种群。同时建议定期更新数据库，以便更准确地鉴定新出现的菌株类型。

该标准为江苏省范围内开展镰刀菌检测提供了科学依据和技术指导，有助于减少小麦赤霉病的发生概率，提高粮食安全水平。