DB37T 3560-2019 荷斯坦牛致死单倍型（HH1、HH3、HH4和HH5）基因检测技术规程

DB37/T 3560-2019是山东省地方标准，规定了荷斯坦牛四种致死单倍型（HH1、HH3、HH4和HH5）的基因检测技术要求。以下是对该标准中关键内容的深度解读：

1. 适用范围：标准适用于荷斯坦牛遗传改良过程中对四种致死单倍型的检测。这为奶牛育种提供了科学依据。

2. 术语和定义：

- 致死单倍型：指携带特定遗传变异的染色体组合，在胚胎发育早期导致死亡的现象。

- 核酸提取：从动物组织或血液样本中分离出DNA的过程。

3. 样品采集与保存：

- 应使用新鲜血液样本或耳组织样本。

- 样品需在低温条件下保存并尽快送检。

4. 核酸提取：

- 推荐使用商业化试剂盒进行高效提取。

- 提取后的DNA应满足浓度≥20ng/μl且OD260/280值在1.8～2.0之间。

5. 聚合酶链式反应扩增：

- 使用特异性引物对目标区域进行扩增。

- 反应体系包括模板DNA、引物、dNTPs、Taq DNA聚合酶及缓冲液等成分。

6. 电泳分析：

- 扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳分离。

- 不同长度片段对应不同单倍型结果。

7. 质量控制：

- 设置阳性对照和阴性对照以确保实验准确性。

- 每次检测至少重复两次以验证结果可靠性。

8. 数据记录与报告：

- 记录所有实验参数如样本编号、日期、操作人员等信息。

- 最终出具包含检测结果、结论以及建议等内容的正式报告。

以上内容基于DB37/T 3560-2019标准制定，旨在规范荷斯坦牛致死单倍型基因检测流程，提高检测效率和准确性，促进优质奶牛品种培育工作开展。