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资源简介
摘要：本文件规定了霍山石斛分子鉴定的术语和定义、检测原理、样品采集与处理、DNA提取、PCR扩增、电泳检测及结果分析等内容。本文件适用于霍山石斛及其相关产品的分子鉴定。
Title：Technical Regulations for Molecular Identification of Dendrobium huoshanense
中国标准分类号：B31
国际标准分类号：67.080 -
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拓展解读
《DB34/T 3244-2018 霍山石斛分子鉴定技术规程》是一项专门用于霍山石斛分子鉴定的技术标准。该标准规定了利用DNA条形码技术对霍山石斛进行物种鉴定的方法和流程，适用于霍山石斛及其近缘种的区分与确认。
其中关键条款包括：
5.1 样品采集：要求从植物新鲜叶片或茎部采集样本，确保样品无污染且具有代表性。
5.2 样品处理：将采集到的样品进行液氮速冻保存，并在-80℃条件下长期存储。同时要记录采样地点、时间等信息。
5.3 DNA提取：采用改良CTAB法提取总DNA，确保提取效率达到80%以上，浓度不低于50ng/μL。
6.1 PCR扩增：使用特异性引物对rbcL基因片段进行PCR扩增。反应体系包括模板DNA、上下游引物各0.2μmol/L、2×Premix Taq酶混合物12.5μL以及ddH2O补足至25μL。
6.2 扩增程序：设定初始变性温度为94℃持续5min；然后进行35个循环，每个循环包括94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸1min；最后在72℃延伸10min结束。
6.3 电泳检测：将扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳分离后，利用凝胶成像系统观察结果。预期得到约600bp大小的目标条带。
7.1 数据分析：将测序获得的序列提交至GenBank数据库比对，获取最高相似度匹配结果作为鉴定依据。当相似度大于98%时可认定为同一种类。
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最后更新时间 2025-06-04
