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摘要:本文件规定了禽白血病ABJ亚群的PCR检测方法,包括样品采集、DNA提取、PCR扩增及结果分析。本文件适用于禽白血病ABJ亚群的实验室检测与诊断。
Title:Detection of Avian Leukosis Virus ABJ Subgroup by PCR Method
中国标准分类号:B 46
国际标准分类号:65.020
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拓展解读
DB22/T 2921-2018《禽白血病ABJ亚群检测 PCR法》是一项针对禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus ALV)ABJ亚群的检测方法标准。这项标准为实验室提供了规范化的操作流程,确保检测结果的准确性和可靠性。以下将选取部分关键条款进行详细解读。
3.1 样品采集与处理
样品应从健康状况良好的鸡群中随机抽取,采集血液或组织样本。样品应在采样后4小时内送至实验室进行检测,如不能及时送检,需将样品置于-70℃以下保存。这一规定旨在保证样品的新鲜度和活性,避免因保存不当导致病毒失活影响检测结果。
5.1 标准曲线的制备
使用已知浓度的标准品进行十倍梯度稀释,每个浓度设置三个重复。以Ct值为纵坐标,对数转换后的病毒拷贝数为横坐标绘制标准曲线。此步骤要求严格控制实验条件,确保标准曲线的线性关系良好,R²值大于0.99,这样才能保证后续样品检测结果的准确性。
6.2 结果判定
当样品Ct值小于等于标准曲线最低浓度对应的Ct值时,判定为阳性;当样品Ct值大于标准曲线最高浓度对应的Ct值时,判定为阴性;当样品Ct值介于两者之间时,需重复试验。如果重复试验结果仍处于该范围内,则需要进一步扩大检测范围或者采用其他检测方法进行验证。此判定规则明确了不同Ct值区间的结果含义,有助于统一判断标准,减少主观因素的影响。
通过以上条款的解读可以看出,该标准在样品采集、标准曲线制备以及结果判定等方面都提出了明确的要求,这些措施对于确保禽白血病ABJ亚群PCR检测的科学性和准确性具有重要意义。