DB22T 973-2019 猪霉形体肺炎检测 ELISA法

《DB22/T 973-2019猪霉形体肺炎检测 ELISA法》标准解读

DB22/T 973-2019是吉林省地方标准，规定了利用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测猪霉形体肺炎的相关要求。以下选取部分关键内容进行详细解读。

5.1 样品采集与处理

该条款指出样品应从病猪的鼻腔、咽喉或气管抽取，确保样本新鲜且无污染。采集后需立即放入密封容器内，并在4℃条件下保存不超过24小时，若超过则应置于-20℃冷冻保存。此规定旨在保证样本活性，避免因保存不当导致检测结果偏差。

6.1 检测试剂盒选择

标准明确要求使用经国家认证的ELISA试剂盒，且试剂盒有效期不得少于3个月。同时强调试剂盒必须具备清晰的产品说明书，包括操作步骤、灵敏度、特异性等信息。这是为了确保检测过程规范，提高结果准确性。

7.1 操作步骤

按照试剂盒说明书进行操作，将样本稀释至指定浓度后加入酶标板孔中。每份样本需设两个平行孔，同时设置阴性对照和阳性对照各两孔。孵育时间为37℃下60分钟，洗涤液需充分冲洗以去除未结合物质。显色剂A和B按1:1比例混合后避光显色15分钟。最后用终止液终止反应，并在酶标仪上读取OD值。

8.1 结果判定

根据标准提供的临界值计算公式：(P/N) = (样本OD值/阴性对照平均OD值)，当P/N≥2.1时判定为阳性；当0.4

附录A 试剂盒性能指标

附录A详细列出了合格试剂盒应满足的各项性能指标，如灵敏度≥95%，特异性≥99%，批间变异系数≤10%等。这些指标为试剂盒生产商提供了质量控制依据，同时也为使用者提供了选择优质试剂盒的标准。

附录B 实验室环境要求

附录B明确了实验室应具备的基本条件，包括温度控制在18-25℃之间，相对湿度保持在45%-75%，并配备超净工作台、离心机、酶标仪等必要设备。良好的实验环境是获得准确可靠检测结果的基础保障。

通过以上解读可以看出，DB22/T 973-2019标准对猪霉形体肺炎ELISA检测的各个环节都做出了明确规定，具有很强的操作性和指导意义。严格执行该标准有助于提高检测效率和准确性，为防控猪霉形体肺炎提供有力技术支持。