DB21T 3111-2019 水质肠球菌的测定固定底物技术酶底物法

DB21/T 3111-2019《水质 肠球菌的测定 固定底物技术 酶底物法》是一项辽宁省地方标准，规定了利用酶底物法测定水体中肠球菌的方法。以下是对该标准中一些重要条文的详细解读：

适用范围

标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中肠球菌的测定。这一范围明确了该方法可以广泛应用于各种类型的水体检测，确保了其在环境监测中的实用性。

方法原理

酶底物法基于特定的培养基，这种培养基含有能够被肠球菌代谢产生特异性酶的底物。当肠球菌存在于样品中时，会释放出这种酶，导致培养基颜色发生变化。这种方法通过观察颜色变化来判断是否存在肠球菌以及其数量。

样品采集与保存

标准要求样品应在4℃条件下采集，并尽快分析。如果不能立即分析，则需将样品冷藏至0-4℃并在24小时内完成测试。此外，还应使用无菌容器以防止外部污染影响结果准确性。

实验步骤

1. 样品稀释：根据预期浓度选择适当的稀释倍数。

2. 接种：将稀释后的样品均匀涂布于预热至36±1℃的培养皿中。

3. 培养：将接种后的培养皿放入恒温箱内，在36±1℃条件下培养24小时。

4. 观察结果：检查培养基的颜色变化情况。

结果计算

通过比较阳性反应孔的数量与总孔数的比例来估算样品中肠球菌的数量。具体计算公式为：

\\[ C = n \\times M \\]

其中 \\(C\\) 表示每升水中肠球菌的数量 (\\(CFU/L\\))，\\(n\\) 是阳性反应孔数，\\(M\\) 是每个孔所代表的体积（ml）。

注意事项

- 在整个操作过程中必须严格遵守无菌操作规程。

- 使用新鲜配制或经过验证有效的试剂。

- 定期校准仪器设备以保证测量精度。

以上是对DB21/T 3111-2019标准中关键部分的深入解析。此标准提供了一种快速准确测定水体中肠球菌含量的有效手段，对于保障公共健康具有重要意义。