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摘要:本文件规定了动物尿液中苯乙醇胺A的测定方法——酶联免疫吸附法。本文件适用于牛、羊等反刍动物尿液中苯乙醇胺A的定性及定量检测。
Title:Determination of Benzethidazole A in Animal Urine - Enzyme Linked Immunosorbent Assay
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:67.120
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拓展解读
DB13/T 2894-2018《动物尿液中苯乙醇胺A的测定 酶联免疫吸附法》是一项河北省地方标准,规定了使用酶联免疫吸附法检测动物尿液中苯乙醇胺A的具体操作步骤和质量控制要求。以下是对该标准中关键条文的详细解读:
范围
标准适用于动物尿液中苯乙醇胺A含量的测定。这一范围明确了该方法的应用领域,确保使用者了解其适用性和局限性。
规范性引用文件
标准中引用了多个相关标准,如GB/T 6682关于实验室用水的规定等。这些引用文件为方法提供了技术支持,保证了实验条件的一致性和可靠性。
原理
苯乙醇胺A与酶标板上的抗体特异性结合,通过抗原抗体反应形成复合物。加入显色剂后,根据颜色变化来判断样品中苯乙醇胺A的浓度。此原理说明了检测的基本机制,即利用免疫学反应实现定量分析。
试剂与材料
标准对所需试剂进行了明确规定,包括苯乙醇胺A标准品、包被液、封闭液、洗涤液等。这些试剂的选择直接影响检测结果的准确性,因此需要严格按照标准执行。
仪器设备
列出了一系列必要的仪器设备,如酶标仪、微量移液器等。这些设备的选择和校准对于获得精确的数据至关重要。
样品处理
样品处理部分详细描述了如何采集、保存及预处理尿样。例如,要求尿样在-20℃下保存不超过6个月,并且在检测前需经过适当稀释。这一步骤确保了样品的状态适合后续分析。
实验步骤
实验步骤包括包被、封闭、加样、温育、洗板、显色等多个环节。每个步骤都有具体的时间和温度要求,以保证反应的有效性和一致性。例如,温育时间通常设定为37℃下1小时。
结果计算
通过绘制标准曲线并利用软件或手动计算得出样品中苯乙醇胺A的浓度。强调了标准曲线的重要性以及如何正确地应用它来评估未知样品。
质量控制
提出了质控措施,比如设置空白对照、阳性对照和阴性对照,以及定期校准仪器设备。这些措施有助于监控整个检测过程的质量,减少误差。
注意事项
最后还特别提醒了一些注意事项,如避免交叉污染、妥善处置废弃物等。这些细节虽然看似简单,但却是保障实验安全和数据准确性的关键。
综上所述,DB13/T 2894-2018提供了一套完整且严谨的方法论,用于测定动物尿液中的苯乙醇胺A。通过对上述条文的理解与实践,可以有效提高检测效率并保证结果的科学性和客观性。