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摘要:本文件规定了动物尿液中西马特罗的测定方法——酶联免疫吸附法。本文件适用于牛、羊、猪等动物尿液中西马特罗残留量的检测。
Title:Determination of cimaterol in animal urine - Enzyme linked immunosorbent assay
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:67.120.30
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拓展解读
DB13/T 2893-2018《动物尿液中西马特罗的测定 酶联免疫吸附法》是一项河北省地方标准,规定了采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定动物尿液中西马特罗残留量的技术要求。以下为该标准的重要条文及其详细解读:
样品采集与处理
4.1 样品采集
样品应从健康动物中采集,确保样本来源可靠。采样时需避免污染,使用无菌容器,并在低温条件下保存运输。
解读:此条款强调了样品采集的基本原则,包括保证样本的真实性、防止外界因素干扰以及保持样本活性。这一步骤直接关系到后续检测结果的准确性。
4.2 样品前处理
将采集好的尿样离心去除杂质后,取上清液用于实验。具体操作步骤按照附录A执行。
解读:前处理是确保检测精度的关键环节之一。通过离心可以有效去除尿液中的固体颗粒和其他杂质,从而提高检测灵敏度和特异性。
测定步骤
5.1 包被抗体的制备
用抗西马特罗单克隆抗体包被酶标板孔,每孔加入适量稀释液,置于37℃条件下孵育2小时。
解读:包被抗体的质量直接影响到整个测定过程的成功与否。合适的孵育时间和温度能够使抗体与抗原充分结合,形成稳定的复合物。
5.2 标准曲线绘制
分别加入不同浓度的标准溶液于酶标板孔内,设置空白对照组。经过一系列反应后,在450nm波长下测量吸光值。
解读:标准曲线是定量分析的基础,它反映了待测物质浓度与其响应信号之间的关系。准确绘制标准曲线对于精确计算样品中目标物含量至关重要。
5.3 样品测定
将处理好的尿样加入已包被抗体的酶标板孔中,按上述方法进行操作并记录数据。
解读:此部分明确了实际操作流程,包括样品加入方式、反应条件等细节。严格按照规程操作可减少人为误差,提升检测结果的一致性。
结果计算
根据标准曲线得到样品对应的吸光值,利用公式计算出样品中西马特罗的具体含量。
解读:通过数学模型将实验观测值转化为实际数值,体现了科学严谨的态度。同时提醒使用者注意校正因子的选择以适应不同仪器设备的特点。
注意事项
- 实验全程应严格遵守实验室安全规范。
- 定期对仪器设备进行维护保养,确保其处于良好工作状态。
- 对于超出线性范围的数据点需重新取样验证。
解读:这些注意事项涵盖了从实验准备到结果报告全过程的安全保障措施,有助于提高工作效率的同时也保护了工作人员的身体健康。