DB15T 1531-2018 反刍动物瘤胃上皮通透性测定 Ussing Chamber法

DB15/T 1531-2018《反刍动物瘤胃上皮通透性测定 Ussing Chamber法》是一项地方标准，用于指导通过Ussing Chamber法测定反刍动物瘤胃上皮的通透性。这项技术对于研究瘤胃健康、营养吸收以及疾病诊断具有重要意义。

关键条文解读

# 范围

本标准规定了使用Ussing Chamber法测定反刍动物瘤胃上皮通透性的基本要求和操作步骤。适用于科研机构、高校及养殖企业等单位。

# 术语和定义

- Ussing Chamber：一种用于测量组织电位差和离子电流的装置，可用来评估细胞膜的完整性与功能。

- 瘤胃上皮通透性：指瘤胃上皮允许物质通过的能力，通常用特定标记物的渗透率来表示。

# 试验材料与设备

试验所需的材料包括新鲜采集的瘤胃液样本、适当的缓冲液（如Krebs-Ringer bicarbonate buffer）以及必要的化学试剂。设备则需要一台完整的Ussing Chamber系统，包括两个半室、电极、Ag/AgCl参比电极、温度控制装置等。

# 样品制备

样品制备是确保结果准确的关键环节。首先需从健康反刍动物瘤胃中取出适量组织样本，并立即置于预冷的生理盐水中保存。随后，在无菌条件下将组织剪成适当大小的小块，准备放入Chamber内腔进行后续实验。

# 测定步骤

1. 将处理好的瘤胃组织放置于Chamber的一侧腔体内。

2. 加入预先配制好的缓冲液至两侧腔体中，注意保持恒定的温度（一般为37°C）。

3. 连接好所有的电路连接点，启动数据采集软件开始记录数据。

4. 观察并记录不同时间点上的电压变化情况。

5. 实验结束后计算出相应的渗透系数值。

# 数据分析

数据分析时应重点关注以下几个方面：

- 电压随时间的变化趋势；

- 不同时间段内的平均电压值；

- 计算得到的渗透系数是否符合预期范围。

# 注意事项

在实际操作过程中需要注意以下几点：

- 确保所有器材处于良好状态且经过校准；

- 操作人员必须接受过专业培训；

- 实验环境应保持安静整洁以减少外界干扰因素的影响。

此标准不仅提供了详细的指导方针，还强调了实验过程中的安全措施和个人防护的重要性。遵循这些准则可以帮助研究人员获得可靠有效的实验数据。