DB22T 2565-2016 流感病毒MDCK细胞病毒分离检测法

摘要：本文件规定了利用MDCK细胞进行流感病毒分离和检测的方法，包括样品处理、细胞培养、病毒感染、观察与鉴定等步骤。本文件适用于流感病毒的实验室检测和研究。
Title：Detection method of influenza virus isolation using MDCK cells
中国标准分类号：C46
国际标准分类号：11.020

《DB22/T 2565-2016 流感病毒MDCK细胞病毒分离检测法》是一项关于流感病毒检测的重要地方标准。以下将对标准中的一些关键条款进行详细解读。

首先，在范围部分，该标准规定了使用MDCK细胞进行流感病毒分离和检测的方法，适用于从临床标本中分离流感病毒。这为实验室提供了明确的操作指导范围。

其次，在规范性引用文件部分，标准列出了多个相关的国家标准和行业标准。这些引用文件是确保检测方法科学性和权威性的基础，实验室在执行时需参照这些标准。

再者，在术语和定义部分，明确了“MDCK细胞”、“流感病毒”等专业术语的概念。例如，“MDCK细胞”是指一种犬肾上皮细胞系，广泛用于病毒培养；“流感病毒”则是指引起流行性感冒的正粘病毒科流感病毒属的病毒。准确理解这些术语对于正确开展实验至关重要。

接着，在技术要求部分，标准详细描述了实验材料、仪器设备、试剂与耗材的选择及准备。比如，要求使用的MDCK细胞必须处于对数生长期，且细胞密度应达到70%-90%。同时，对实验环境条件如温度、湿度也有明确规定，以保证实验结果的准确性。

此外，关于操作步骤，标准给出了详细的流程图解。包括标本处理、细胞接种、孵育观察等环节的具体操作方法。特别是在孵育过程中，需要定期检查细胞病变情况，并记录相关数据。一旦发现典型的细胞病变效应（CPE），即可初步判断存在流感病毒感染。

最后，在结果判定与报告部分，标准强调了结果分析的重要性。要求结合细胞病变特征、特异性染色实验以及RT-PCR等分子生物学技术手段综合判断。最终出具的检测报告应当包含样本信息、检测方法、实验结果等内容，并由授权签字人签发。

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