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摘要:本文件规定了草莓脱毒种苗病毒检测的术语和定义、检测原理、样品采集与处理、检测方法及结果判定。本文件适用于草莓脱毒种苗生产过程中的病毒检测和质量控制。
Title:Strawberry Virus-free Seedling Virus Detection Technical Regulations
中国标准分类号:B 46
国际标准分类号:65.020.20
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拓展解读
《草莓脱毒种苗病毒检测技术规程》(DB65/T 3915-2016)是由新疆维吾尔自治区质量技术监督局批准发布的地方标准。该标准规定了草莓脱毒种苗病毒检测的技术要求、方法和步骤,适用于草莓脱毒种苗的病毒检测。
标准中指出,草莓脱毒种苗的病毒检测应包括以下几个关键环节:
1. 样品采集:从草莓植株上选取新生长的嫩叶作为检测样本,确保样品的新鲜度和代表性。采集时要使用无菌工具,并做好标记以记录采样时间、地点等信息。
2. 样品处理:将采集到的叶片样本清洗干净后,用剪刀切成小块,然后放入研钵中加入液氮迅速冷冻并研磨成细粉状。接着将处理好的样品装入离心管内备用。
3. RNA提取:采用适当的试剂盒按照说明书操作步骤完成总RNA的提取工作。注意在操作过程中要严格遵守实验室安全规范,防止污染。
4. 反转录反应:利用反转录酶将提取得到的RNA转化为cDNA。此过程需控制好温度条件及反应时间,保证转化效率。
5. PCR扩增:根据目标病毒序列设计特异性引物,通过PCR仪对cDNA进行扩增。在此阶段要注意选择合适的退火温度以及循环次数,确保能够准确地检测出是否存在特定病毒。
6. 结果分析:通过对扩增产物进行电泳检测或者荧光定量PCR等方式来判断是否含有目标病毒。如果发现阳性结果,则需要进一步确认实验重复性和准确性。
7. 报告编写:最后整理所有数据资料形成完整的检测报告,内容应当包含基本信息如客户名称、样品描述等;检测方法概述;实验流程说明;最终结论等内容。
以上就是关于《草莓脱毒种苗病毒检测技术规程》(DB65/T 3915-2016)的一些重点条款解读。希望这些信息能帮助您更好地理解和应用这一标准。