DB42T 1110-2015 牛支原体体外药物敏感性检测操作规程

《DB42/T 1110-2015 牛支原体体外药物敏感性检测操作规程》是湖北省地方标准，为牛支原体体外药物敏感性检测提供了系统规范的操作方法。以下对规程中的重要条文进行详细解读：

在样本采集部分，规程指出需从患病牛只的呼吸道分泌物或病变组织中采集样本。强调样本应新鲜且无污染，这是确保检测结果准确性的关键。样本采集后应立即送检，最长不超过24小时，若不能及时检测则需冷冻保存。

关于培养基制备，规程要求使用含10%-20%胎牛血清的改良PPLO液体培养基。培养基需在37℃条件下灭菌20分钟，冷却至室温后再加入抗生素抑制杂菌生长。这一过程保证了培养基适合牛支原体生长的同时有效排除其他微生物干扰。

药物敏感性试验采用琼脂稀释法，规定每种药物需配制10个不同浓度梯度。初始浓度为最低抑菌浓度估计值的1/4，逐步倍增直至最高浓度。此方法可全面评估药物对牛支原体的抑制效果，为临床用药提供科学依据。

在结果判定上，规程明确以肉眼观察到的最小抑菌浓度作为判断标准。当培养基完全透明时表明该药物对该浓度下的牛支原体有抑制作用。同时要求至少进行两次独立重复实验以验证结果可靠性，这对于提高检测准确性至关重要。

此外，规程还特别强调实验室环境控制，要求保持温度恒定、空气洁净以及操作人员严格执行无菌操作规程，这些都是保障检测质量的基础条件。