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摘要:本文件规定了粮食中串珠镰刀菌的PCR检测方法,包括样品处理、DNA提取、PCR扩增及结果分析等内容。本文件适用于粮食及其制品中串珠镰刀菌的检测与鉴定。
Title:Detection of Fusarium Moniliforme in Grains by PCR - DB22T 1820-2013
中国标准分类号:B 46
国际标准分类号:67.040
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拓展解读
DB22/T 1820-2013是吉林省地方标准,规定了粮食中串珠镰刀菌的PCR检测方法。以下是对该标准中重要条文的详细解读:
标准中规定了检测环境应保持清洁无污染,实验器具需经过灭菌处理并单独使用。这是为了防止外界污染影响检测结果。
在样品采集环节,要求从不同部位取样混合,确保样本具有代表性。样品量不得少于250克,并且需要迅速冷冻保存或加工成粉状后冷藏。
标准明确了核酸提取步骤,包括样品研磨、离心等操作。特别强调加入裂解液后需65℃水浴保温1小时以充分释放DNA。
引物设计部分提到针对串珠镰刀菌特异性序列设计引物,确保检测准确性。扩增体系和条件也进行了详细说明,如反应体积、退火温度等参数。
对于扩增产物的检测,标准推荐采用琼脂糖凝胶电泳法。通过观察电泳图谱判断是否含有目标片段,从而确定样品中是否存在串珠镰刀菌。
此外,标准还对结果报告做出了规范,要求记录检测过程中的关键数据,并由专业人员出具正式报告。这一系列严谨的操作流程旨在保证检测结果的真实可靠。