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摘要:本文件规定了饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定方法——分光光度法。本文件适用于饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定。
Title:Determination of Acid Protease Activity in Feed Enzyme Preparations - Spectrophotometric Method
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:65.120
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拓展解读
DB22/T 1819-2013是吉林省地方标准,规定了饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定方法——分光光度法。以下是对该标准中重要条文的详细解读。
在范围部分,标准明确了适用于以饲料用酶制剂为样品的酸性蛋白酶活力测定。这为后续的具体操作提供了适用范围的基础。
术语和定义部分对关键概念进行了说明。例如,“酸性蛋白酶”被定义为在特定pH条件下能够催化蛋白质水解反应的酶。这一定义帮助理解测试的基本原理。
仪器设备部分强调了所需设备的重要性。其中721型或754型分光光度计用于测量吸光度值,恒温水浴锅确保反应温度稳定,离心机用于分离样品中的固体颗粒等。这些设备的选择直接关系到检测结果的准确性。
试剂与溶液部分详细列出了所有需要准备的化学物质及其配制方法。特别是邻苯二甲醛(OPA)试剂的配置过程较为复杂,需精确称量并溶解于甲醇中,最后稀释至一定浓度备用。正确的试剂制备是实验成功的关键步骤之一。
操作步骤部分描述了具体的实验流程。首先将一定量的酶液加入含有酪蛋白溶液的比色管中,在设定好的温度下保温一段时间后立即停止反应,并迅速向反应混合物中添加过量的三氯乙酸终止反应。接着通过离心得到上清液,然后取适量上清液加入OPA试剂中显色,最后使用分光光度计测定其吸光度值。每一步骤都有严格的时间控制和技术要求,以保证数据的一致性和可靠性。
结果计算部分给出了如何根据测得的吸光度值来计算酸性蛋白酶活力的方法。公式中的各个参数均来源于前面的操作步骤,体现了整个测定过程的严谨性。
注意事项部分提醒操作者注意安全防护措施,如佩戴手套防止皮肤接触腐蚀性化学品,以及妥善处理废弃物品等环保问题。此外还特别指出应在通风良好的环境中进行实验,避免吸入有害气体。
附录A提供了详细的参考文献列表,便于读者查阅原始研究资料进一步了解相关背景知识。
综上所述,DB22/T 1819-2013不仅提供了一套完整的测定饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的技术方案,而且通过详尽的文字说明确保了方法的可重复性和准确性。这对于从事饲料行业质量控制的专业人士来说是一项非常有价值的参考资料。