DB13T 1090-2009 饲料用酶制剂中木聚糖酶活力的测定 分光光度法

摘要：本文件规定了饲料用酶制剂中木聚糖酶活力的测定方法——分光光度法。本文件适用于饲料用酶制剂中木聚糖酶活力的测定。
Title：Determination of Xylanase Activity in Feed Enzyme Preparations - Spectrophotometric Method
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：65.120

DB13/T 1090-2009是河北省地方标准，规定了饲料用酶制剂中木聚糖酶活力测定的分光光度法。以下是对该标准中一些重要条文的详细解读：

在试剂和材料部分，标准要求使用特定浓度的对硝基酚-β-D-吡喃木糖苷溶液作为底物溶液，并且要确保其纯度达到95%以上。同时，缓冲液的选择和配制也至关重要，通常采用醋酸-醋酸钠缓冲体系，pH值需精确控制在一定范围内。

关于仪器设备，分光光度计是必不可少的工具，其波长精度、吸光度线性范围以及分辨率都必须满足实验需求。此外，恒温水浴锅用于维持反应温度稳定，而移液器则保证了样品与试剂添加量的准确性。

在操作步骤上，首先将适量的酶液加入到装有底物溶液的比色皿中开始反应，然后每隔一段时间记录一次吸光度值直至反应结束。通过绘制时间与吸光度变化曲线可以计算出斜率，进而推导出酶活力大小。

结果计算公式为：V=（A-B）/K×t×d/m，其中V表示每分钟内转化1微摩尔底物所需的酶量即酶活单位U；A代表测得的最大吸收峰高度差；B为对照组空白试验所得值；K为吸光系数；t是反应持续时间；d是比色皿光径长度；m为样品质量或体积。

需要注意的是，在整个过程中要严格遵守无菌操作规程，防止外界因素干扰实验结果。另外，定期校准仪器设备以确保测量数据可靠也是十分重要的环节之一。