TCSTM 00999-2023 玉米褪绿斑驳病毒 形态学检测 透射电子显微镜法

摘要：本文件规定了玉米褪绿斑驳病毒形态学检测的透射电子显微镜法的样品制备、观察步骤和技术要求。本文件适用于玉米褪绿斑驳病毒的形态学鉴定和检测。
Title：Maize chlorotic mottle virus - Morphological detection by transmission electron microscopy
中国标准分类号：
国际标准分类号：

本文以《TCSTM 00999-2023玉米褪绿斑驳病毒形态学检测透射电子显微镜法》中的“样品制备”部分为例，详细解读其在新旧版本中的变化及具体应用方法。

在旧版标准中，样品制备仅简单提及需要将叶片组织切片后进行固定处理。而在新版标准中，这一过程得到了细化，增加了对样品前处理的要求以及固定液的选择和配比说明。新版标准特别强调了样品新鲜度的重要性，并指出应在采集样本后立即置于冰上保存，以减少细胞结构的破坏。此外，对于固定液的使用，新版标准推荐采用磷酸缓冲液配制的戊二醛溶液，并给出了具体的浓度比例为2.5%，这有助于更好地保持病毒颗粒的原始形态。

实际操作时，首先确保采集到的是典型的受感染叶片组织，然后迅速将其放置于冰上运输至实验室。进入实验室后，应立即将叶片切成1毫米×1毫米的小块，以便于后续处理。接下来，将这些小块放入预先准备好的2.5%戊二醛磷酸缓冲液中，在4°C条件下固定至少4小时。固定完成后，还需经过一系列的脱水、浸透和包埋步骤，最终形成适合透射电子显微镜观察的超薄切片。

通过这样的改进，新版标准不仅提高了检测结果的准确性，还增强了实验操作的规范性和可重复性。这种细致入微的变化体现了标准制定者对提升检测质量不懈追求的态度。