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摘要:本文件规定了TCASME 668-2023 CD3CD4CD8CD16 CD56CD19CD45检测试剂盒(流式细胞仪法-6色)的技术要求、试验方法、检验规则及标志、包装、运输和贮存要求。本文件适用于基于流式细胞仪法的多参数血液免疫分型检测用试剂盒的研发、生产和质量控制。
Title:TCASME 668-2023 CD3CD4CD8CD16 CD56CD19CD45 Test Kit for Flow Cytometry (6-color)
中国标准分类号:
国际标准分类号:11.100
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拓展解读
本文将聚焦于TCAS ME 668-2023与之前版本在CD45抗体使用上的变化,并详细解读其应用方法。
在旧版标准中,CD45抗体的使用并未明确规定具体的荧光标记类型。而在新版标准TCAS ME 668-2023中,明确指出CD45抗体应选用PE-Cy7标记。这一改变的主要目的是为了提高检测结果的一致性和准确性。PE-Cy7具有较高的荧光强度和较宽的激发波长范围,能够更有效地与其他荧光染料如FITC、PE等区分开来,从而减少信号间的干扰,特别是在多参数分析时更为明显。
那么如何正确应用PE-Cy7标记的CD45抗体呢?首先,在样本制备阶段,需确保细胞悬液浓度适中,通常为1×10^6个/ml左右。其次,在抗体孵育过程中,推荐使用终浓度为1μg/ml的PE-Cy7标记CD45抗体,并保证反应时间不少于20分钟,同时避免光照以防止荧光淬灭。最后,在数据分析环节,利用流式细胞仪软件设定合适的门控策略,先通过FSC/SSC排除碎片和死细胞,再根据CD45表达水平区分不同类型的白细胞群体。
通过这样的操作流程,可以有效提升检测效率及数据可靠性,符合TCAS ME 668-2023对于CD45抗体使用的要求。