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摘要:本文件规定了茄科植物携带番茄褪绿矮缩类病毒的检测方法、样品采集与处理、检测步骤及结果判定。本文件适用于茄科植物中番茄褪绿矮缩类病毒的检测和防控。
Title:Technical Regulations for Detection of Tomato Chlorosis Dwarf Viroid in Solanaceae Plants
中国标准分类号:B 61
国际标准分类号:65.020.01
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拓展解读
《THSPP 0002-2022与旧版标准差异解析——以核酸提取为例》
THSPP 0002-2022《茄科植物携带番茄褪绿矮缩类病毒检测技术规程》较之前版本在多个环节进行了优化调整,其中核酸提取部分的变化尤为显著。新标准引入了磁珠法核酸提取技术,取代了传统试剂盒法,这一改变不仅提高了操作效率,还增强了实验结果的稳定性。
磁珠法核酸提取的优势在于其自动化程度高、耗时短且污染风险低。具体应用时,首先需准备样品,通常取茄科植物叶片组织约0.1克置于离心管中,并加入裂解液充分研磨混匀。随后加入适量磁珠溶液,通过磁力架分离吸附核酸的磁珠。清洗步骤中,利用缓冲液多次洗涤磁珠表面杂质,最后用洗脱液将核酸从磁珠上释放出来。整个过程无需频繁更换移液器枪头,减少了人为误差,同时降低了样本间交叉污染的可能性。
相较于旧版标准中试剂盒法繁琐的操作流程,磁珠法简化了多个环节,尤其适合大批量样本处理。例如,在旧版标准中,试剂盒法需要手动调节多种试剂比例,容易因操作不当导致提取失败;而新标准推荐的磁珠法只需按照固定程序执行,极大地降低了技术门槛,使得非专业人员也能快速掌握并准确完成核酸提取任务。
此外,磁珠法提取得到的核酸纯度更高,OD260/OD280值更接近理论值1.8,这对于后续PCR扩增反应至关重要。高纯度核酸可以有效避免抑制剂干扰,提高检测灵敏度和特异性。因此,在实际工作中,采用THSPP 0002-2022规定的磁珠法核酸提取技术能够显著提升番茄褪绿矮缩类病毒检测的整体质量。
综上所述,THSPP 0002-2022标准中关于核酸提取部分的更新是一次重要的技术革新,它不仅体现了标准化工作的进步方向,也为相关领域的科研工作者提供了更加可靠的技术支持。通过采用磁珠法核酸提取技术,我们可以更高效、更精准地开展茄科植物携带番茄褪绿矮缩类病毒的检测工作,为农业生产提供有力保障。