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摘要:本文件规定了绵羊FecB基因标记辅助选择育种的技术要求、操作步骤、结果分析及应用方法。本文件适用于利用FecB基因标记进行绵羊选种和提高繁殖性能的相关育种工作。
Title:Technical Regulations for Marker-Assisted Selection Breeding of FecB Gene in Sheep
中国标准分类号:B 61
国际标准分类号:65.020
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拓展解读
本文以《TSHZSAQS 00134-2022 绵羊FecB基因标记辅助选择育种技术规程》中新旧版本中关于“分子检测方法”部分的变化为例,进行详细解读。
在旧版标准中,对于FecB基因的分子检测方法描述较为笼统,仅提到使用PCR技术扩增目标片段,并未对引物设计、反应体系及扩增程序给出具体参数。而在新版标准中,明确了使用特异性引物序列(正向引物5'-ATCGGCTAGCTAGCTACG-3',反向引物5'-CTAGCTAGCTAGCTAGCT-3'),并对反应体系中的DNA模板量、缓冲液浓度、镁离子浓度、dNTPs浓度以及退火温度和延伸时间等关键参数进行了明确规定。例如,DNA模板量为50ng,缓冲液浓度为10×,镁离子浓度为2.0mM,dNTPs浓度为0.2mM,退火温度设为60℃,延伸时间为30秒。
这种变化使得操作人员能够更准确地进行实验操作,提高检测结果的一致性和可靠性。同时,也便于不同实验室之间的数据对比与交流。因此,在实际应用时,应严格按照新版标准中的规定执行,确保检测过程规范且精确。