TCVMA 12-2018 猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光RT-PCR检测方法

摘要：本文件规定了猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光RT-PCR检测的样品采集、RNA提取、实时荧光RT-PCR反应体系及条件、结果分析等内容。本文件适用于猪繁殖与呼吸综合征病毒的实验室检测和诊断。
Title：Detection method of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus by Real-time Fluorescent RT-PCR
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：65.120

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是一种对养猪业影响极大的传染病，其病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）。为了更快速、准确地对该病毒进行检测，TCVMA 12-2018标准提出了猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光RT-PCR检测方法。该方法基于逆转录聚合酶链式反应技术，利用荧光探针实时监测扩增过程中的DNA积累量，从而实现对PRRSV的精准识别。

此检测方法的主要优势在于高灵敏度和特异性。它能够有效区分PRRSV与其他病原体，避免了传统检测方法中可能出现的交叉反应问题。此外，由于是实时检测，可以动态观察扩增曲线，有助于及时判断结果并减少操作误差。

在实际应用过程中，首先需要提取样本中的RNA，然后通过逆转录酶将其转化为cDNA。接下来，使用特异性的引物和探针进行PCR扩增。在此阶段，荧光信号会随着目标序列的增加而增强，最终通过仪器记录下完整的扩增曲线。根据曲线形态及阈值设定，即可判定样品是否含有PRRSV。

值得注意的是，在执行该标准时，必须严格遵守实验室规范，确保试剂的质量以及操作人员的专业技能。同时，还需定期校准设备以保证数据准确性。此方法不仅适用于临床诊断，还可用于疫病监测及研究工作，为防控PRRS提供了强有力的技术支持。