TGXTC 0015-2024 菠萝蜜抗寒基因挖掘技术规范 基于转录组测序技术

摘要：本文件规定了基于转录组测序技术进行菠萝蜜抗寒基因挖掘的流程、数据分析方法及结果验证要求。本文件适用于菠萝蜜抗寒相关基因的研究与开发，为品种改良和育种提供技术支持。
Title：Technical Specification for Durian Anti-cold Gene Mining Based on Transcriptome Sequencing
中国标准分类号：B 61
国际标准分类号：65.020

在TGXTC 0015-2024《菠萝蜜抗寒基因挖掘技术规范》中，与旧版相比，转录组测序技术的应用得到了更加详细的规范。本文将聚焦于“转录组样本制备”这一关键环节的变化，特别是关于样本RNA完整性要求的提升及其实际应用方法。

在旧版标准中，对RNA完整性的描述较为笼统，仅要求RNA样品无明显降解即可满足后续实验需求。而在新版标准中，则明确规定了RNA样品需达到RIN值（RNA Integrity Number）≥7.5的标准，且要求使用Bioanalyzer 2100或其他等效设备进行检测。这一变化旨在确保转录组数据的质量和可靠性。

为了实现这一更高的RNA质量标准，在实际操作过程中，研究者需要采取以下措施：首先，在采样时应尽量缩短从植物组织采集到RNA提取的时间间隔，通常建议不超过30分钟；其次，使用液氮快速冷冻样本，并在低温条件下完成后续处理步骤；再次，在RNA提取过程中选用高效的试剂盒，并严格按照说明书操作，同时注意避免RNase污染；最后，在正式构建文库前，务必通过电泳或高灵敏度仪器准确评估RNA质量，只有符合RIN值要求的样本才能进入下一步工作流程。

通过严格执行这些改进后的技术细节，可以有效提高菠萝蜜抗寒相关基因挖掘工作的成功率和准确性，为后续生物信息学分析奠定坚实基础。