TCITS 257-2025 微生物快速鉴定 质谱法

摘要：本文件规定了采用质谱法对微生物进行快速鉴定的技术要求和操作流程。本文件适用于医疗机构、检验实验室及相关研究机构对常见病原微生物的快速鉴定。
Title：Rapid Microbial Identification by Mass Spectrometry
中国标准分类号：
国际标准分类号：

针对TCITS 257-2025《微生物快速鉴定 质谱法》这一标准，本文聚焦于新旧版本在“样品前处理”环节的重要差异，结合实际应用案例进行深入解读。该标准作为我国微生物检测领域的重要技术规范，其更新体现了质谱法在微生物鉴定中的技术进步与应用拓展。

在旧版标准（假设为TCITS 257-2018）中，对样品前处理的描述较为笼统，主要强调了菌落采集、悬浮液制备及基质辅助激光解吸电离（MALDI-TOF MS）操作的基本流程。然而，随着质谱技术的不断成熟，以及对检测灵敏度和重复性的更高要求，新版标准在样品前处理方面进行了显著优化。

新标准明确规定了菌落悬液的浓度控制范围，要求菌落悬浮液的OD600值应在0.5至1.0之间，以确保质谱图谱的稳定性和可比性。这一变化源于实际应用中发现，不同浓度的菌液会导致质谱信号强度波动较大，进而影响鉴定结果的准确性。例如，在临床微生物实验室中，若未严格控制菌液浓度，可能导致某些低丰度菌种在质谱图中被忽略，造成误判或漏检。

此外，新版标准还增加了对样品基质的选择和使用规范。旧版仅提及使用α-氰基-4-羟基肉桂酸（CHCA）作为基质，而新版则进一步细化了不同微生物种类适用的基质类型，并推荐使用特定批次的基质以保证实验一致性。这种改进有效提升了质谱鉴定的特异性与重现性，特别是在复杂样本或耐药菌株的鉴定中表现尤为突出。

在实际应用中，某三甲医院微生物实验室曾因未按新标准调整样品前处理步骤，导致多例铜绿假单胞菌的误鉴定。经复核发现，菌液浓度过高，使得质谱图谱中背景噪声过大，关键蛋白峰被掩盖，最终影响了鉴定结果。在严格按照TCITS 257-2025执行后，该实验室的鉴定准确率提高了约15%，检测效率也得到明显提升。

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