资源简介
摘要:本文件规定了粳稻品种真实性和纯度SSR分子标记检测的术语和定义、原理、试验材料、仪器设备、试剂与耗材、试验步骤、结果分析及报告。本文件适用于粳稻品种的真实性鉴定和种子纯度检测。
Title:Detection Method for Authenticity and Purity of Japonica Rice Varieties by SSR Molecular Markers
中国标准分类号:B 61
国际标准分类号:65.020.01
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拓展解读
DB32/T 4964-2024《粳稻品种真实性与纯度SSR分子标记检测方法》是一项江苏省地方标准,主要用于通过SSR(简单重复序列)分子标记技术对粳稻品种的真实性与纯度进行检测。以下将选取部分关键条款进行详细解读。
标准适用范围
该标准适用于江苏省内粳稻品种的真实性与纯度检测。这意味着,无论是科研单位、种子企业还是质量监督部门,在涉及江苏地区粳稻品种管理时均可参考此标准执行相关检测工作。
样品采集与处理
样品的采集需遵循随机性原则,确保所取样本能够代表整个批次的质量状况。对于每份样品而言,至少需要采集10株植株作为检测对象,并按照规定的方法进行DNA提取。标准中特别强调了DNA提取过程中应避免污染,以保证检测结果的准确性。
SSR引物选择
本标准推荐使用经过验证有效的SSR引物组合来区分不同品种。这些引物的设计基于粳稻基因组中的特异性位点,能够在电泳图谱上显示出清晰可辨的独特带型。在实际操作前,应对所有使用的引物进行预实验,确认其扩增效率及特异性符合要求。
检测步骤
1. PCR扩增:按照设定好的反应体系和条件进行聚合酶链式反应。
2. 电泳分离:利用毛细管电泳仪或聚丙烯酰胺凝胶电泳系统对扩增产物进行分离。
3. 数据分析:根据获得的电泳图谱,比对目标品种的标准指纹图谱库,判断是否存在差异。
结果判定
如果待测样品与已知标准品种之间的差异不超过允许范围,则认为该样品为该品种;反之,则判定为非预期品种或混杂品种。此外,对于纯度检测,还需计算出每个品种占总样本的比例,以此评估种质资源的纯净程度。
注意事项
- 在整个检测流程中,必须严格控制环境因素如温度、湿度等,防止外界干扰影响结果。
- 定期校准仪器设备,确保测量精度。
- 建立完善的档案管理制度,妥善保存原始数据及相关资料。
综上所述,《粳稻品种真实性与纯度SSR分子标记检测方法》不仅提供了科学严谨的技术指导,也为促进江苏省乃至全国范围内优质粳稻产业健康发展奠定了坚实基础。