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摘要:本文件规定了猪瘟强毒与猪瘟疫苗弱毒的鉴别检测技术方法,包括样品采集、处理、检测步骤及结果判定。本文件适用于猪瘟病毒的实验室鉴别检测及相关研究工作。
Title:Animal Disease Differentiation Detection Technology - Part 1: Classical Swine Fever Virulent Strain and Attenuated Vaccine Strain
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:65.120
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拓展解读
DB37/T 4754.1—2024《动物疫病鉴别检测技术 第1部分:猪瘟强毒与猪瘟疫苗弱毒》是山东省地方标准,主要用于规范猪瘟强毒和疫苗弱毒的鉴别检测方法。以下是对该标准中一些重要条文的详细解读:
样品采集
标准明确指出样品应从疑似感染猪只的组织、血液或分泌物中采集。特别强调了样本的新鲜度和代表性,要求在采样后立即处理以防止病毒失活。
检测方法
1. RT-PCR法
- 本方法通过特异性引物扩增目标基因片段来区分猪瘟强毒和弱毒。标准规定了反应体系的组成及反应条件,并要求使用阳性对照和阴性对照确保结果准确性。
- 注意事项包括引物设计需覆盖病毒基因组上的差异区域,同时对试剂盒的选择也有严格要求。
2. ELISA法
- 利用抗原抗体反应原理检测样品中的特定蛋白。标准提供了详细的试剂准备流程以及操作步骤。
- 强调了质控措施的重要性,如设置空白对照、标准曲线等,以保证实验数据的有效性。
结果判定
对于检测结果的判定标准作了明确规定:
- 当采用RT-PCR时,若扩增出的目标片段大小符合预期且与已知标准品一致,则可判定为阳性;
- ELISA法则依据吸光值判断,高于设定阈值视为阳性。
此外,还特别提到如果两种方法得出的结果不一致,则需要重复试验或者采用其他独立的方法进一步确认。
注意事项
最后,在执行过程中还需注意以下几点:
- 实验人员必须经过专业培训并持有相应资格证书;
- 所有使用的设备仪器均需定期校准维护;
- 对废弃物处理严格按照生物安全规定执行,避免环境污染。
以上就是关于DB37/T 4754.1—2024标准中部分内容的重要解读,希望对你有所帮助!