DB15T 3551-2024 呼伦贝尔羊种质资源冷冻保存技术规程

呼伦贝尔羊是我国重要的地方优良品种，其种质资源的冷冻保存对于保护遗传多样性、促进畜牧业可持续发展具有重要意义。DB15/T 3551-2024《呼伦贝尔羊种质资源冷冻保存技术规程》为规范冷冻保存技术提供了科学依据和技术指导。以下将选取规程中的重要条文进行详细解读。

一、样本采集

规程明确指出，样本采集应在健康状况良好的成年羊只中进行，采样部位应选择耳缘静脉或精液采集点。在操作过程中，需严格遵守无菌操作原则，确保样本不受污染。此外，样本采集后应立即置于适宜的保存介质中，并尽快送往实验室进行处理，以保证样本的质量和活性。

二、冷冻保存方法

规程推荐采用程序降温法进行冷冻保存。具体步骤包括：首先将样本逐步降温至-30℃，然后快速冷却至-80℃，最后转移至液氮中长期保存。这一过程需要精确控制降温速率，通常每分钟降温速度为1℃至3℃，以避免冰晶对细胞结构造成损伤。同时，规程强调使用高质量的冻存液，如含有10%甘油或DMSO的溶液，以提高细胞存活率。

三、质量控制与检测

为了确保冷冻保存的效果，规程要求定期对保存样本进行质量检测。主要包括以下几个方面：一是解冻后的细胞活力测试，通常采用台盼蓝染色法评估细胞存活率；二是基因组DNA完整性检测，通过PCR扩增特定片段来验证DNA是否完整；三是微生物污染检测，确保样本未受到细菌、真菌等微生物的污染。这些检测手段有助于及时发现并解决保存过程中可能出现的问题。

四、档案管理

规程特别重视冷冻保存过程中的档案管理工作。要求建立完整的样本信息档案，包括但不限于样本来源、采集时间、保存条件、检测结果等内容。档案应妥善保管，便于后续查阅和追踪。此外，还建议利用信息化手段实现档案的电子化管理，提高工作效率和数据安全性。

综上所述，《呼伦贝尔羊种质资源冷冻保存技术规程》从样本采集到冷冻保存再到质量控制和档案管理，形成了一套完整的操作流程和技术体系。这不仅保障了冷冻保存技术的有效实施，也为我国地方畜禽遗传资源的保护提供了有力支持。