DB37T 4711—2024 海洋动物资源线粒体DNA遗传多样性监测技术规程

《DB37/T 4711—2024海洋动物资源线粒体DNA遗传多样性监测技术规程》是山东省发布的关于海洋动物资源保护的重要技术标准。以下选取了部分关键条文进行详细解读：

一、适用范围

本标准规定了海洋动物资源线粒体DNA遗传多样性监测的技术要求，适用于山东省管辖海域内海洋动物资源的遗传多样性监测工作。

二、术语和定义

1. 线粒体DNA：指存在于细胞质中线粒体内的脱氧核糖核酸。

2. 遗传多样性：指种群内个体间遗传变异的程度。

三、样本采集

1. 样品来源：应从自然环境或人工养殖环境中采集，确保样品具有代表性。

2. 采样数量：每个监测点至少采集30个个体样本。

3. 保存方法：将样品立即置于-80℃冷冻保存，防止DNA降解。

四、DNA提取与检测

1. 提取方法：采用商业化试剂盒进行DNA提取，确保提取效率达到95%以上。

2. 质量控制：使用紫外分光光度计测定DNA浓度，并通过琼脂糖凝胶电泳验证DNA完整性。

3. PCR扩增：选用通用引物对线粒体DNA进行PCR扩增，扩增产物长度应在600bp左右。

五、数据分析

1. 序列比对：利用BLAST工具将测序结果与GenBank数据库中的序列进行比对，确定物种归属。

2. 多态性位点鉴定：统计样本间的单核苷酸多态性（SNP）位点，计算多态性比例。

3. 遗传距离计算：基于Kimura双参数模型计算遗传距离矩阵，构建系统发育树。

六、质量保证

1. 实验室管理：建立完善的实验室管理制度，定期开展内部质控和外部质控。

2. 技术培训：对参与监测工作的技术人员进行专业培训，确保操作规范统一。

3. 数据记录：详细记录整个监测过程中的所有数据信息，形成完整的监测档案。

该标准为山东省海洋动物资源保护提供了科学依据和技术支持，有助于及时掌握海洋动物种群动态变化趋势，为制定有效的保护措施提供参考。