TSATA 077-2024 血清中20种类固醇激素的测定 高效液相色谱-串联质谱法

TSATA 077-2024《血清中20种类固醇激素的测定 高效液相色谱-串联质谱法》在实际应用中，有一项重要的改进体现在内标物的选择与使用上。相较于旧版标准，新版更加注重内标物对检测结果准确性的保障作用。

在TSATA 077-2024中，明确要求每种目标类固醇激素都应采用与其化学性质相近的标准物质作为内标。例如，测定皮质醇时，推荐使用氘代皮质醇（D4-Cortisol）作为内标。这种选择基于以下几个方面的考虑：首先，内标的加入可以在样品制备过程中补偿由于提取效率、仪器响应等因素导致的偏差；其次，氘代化合物具有稳定的同位素丰度比，在多次进样后仍能保持良好的重现性，从而提高定量分析的准确性；最后，通过设置合理的内标浓度范围，可以有效覆盖待测样品浓度的变化区间，确保在整个线性范围内都有较高的回收率和精密度。

为了更好地理解这一规定如何实施，我们可以以具体的实验步骤为例来说明。假设我们要测定血清中的睾酮水平，按照TSATA 077-2024的要求，首先需要准备一定量的氘代睾酮（D3-Testosterone），其浓度通常设定为10 ng/mL至50 ng/mL之间，具体数值取决于预期样品浓度以及仪器灵敏度。然后，在采集到的血清样本中精确加入适量的内标溶液，并与样品充分混合均匀。接下来是样品预处理阶段，包括蛋白沉淀、固相萃取等操作，目的是去除干扰成分并浓缩目标化合物。完成这些步骤之后，将处理好的样品注入高效液相色谱系统，通过反相C18柱分离后进入串联质谱仪检测。在此过程中，利用多反应监测模式（MRM）同时记录目标物及其内标的特征离子峰强度，进而计算出两者之间的响应因子，最终得到待测物的真实含量。

总之，TSATA 077-2024通过对内标物选择和使用的规范化指导，显著提升了血清中类固醇激素测定结果的可靠性与重复性，这对于临床诊断及科研工作都具有重要意义。