DB2308T 184-2023 稻瘟病病菌单孢分离培养技术操作规范

DB2308T 184-2023《稻瘟病病菌单孢分离培养技术操作规范》是针对稻瘟病研究和防控的一项重要技术标准。以下选取其中的关键条款进行详细解读：

1. 样品采集：规定在水稻生育期的不同阶段，从发病部位采集新鲜样品，要求样品新鲜且无污染。这一条确保了后续实验数据的准确性。

2. 消毒处理：样品需用75%酒精浸泡30秒后，再用无菌水冲洗3次。此步骤是为了去除表面杂菌，避免影响后续分离效果。

3. 单孢分离：采用组织分离法或孢子悬浮液涂布法进行分离。组织分离时需挑取病斑边缘的健康组织，而孢子悬浮液浓度应控制在10^6个/mL左右。这些方法能有效提高单孢分离的成功率。

4. 培养条件：将分离得到的菌株接种于PDA培养基上，在25℃恒温箱中暗培养7天。适宜的培养条件有助于菌丝生长和形态观察。

5. 鉴定确认：通过显微镜观察分生孢子形态特征，并与标准图谱对比来鉴定菌种。准确的鉴定对于后续试验具有重要意义。

6. 菌种保存：将纯化的菌株接种至斜面培养基上，置于4℃冰箱保存，每三个月转管一次。良好的保存措施可以延长菌种使用寿命。

以上内容涵盖了稻瘟病病菌单孢分离培养过程中的关键环节，严格按照该规范执行能够获得高质量的研究材料，为稻瘟病防治提供科学依据。