DB65T 4679-2023 脊髓灰质炎病毒型内鉴定规程

摘要：本文件规定了脊髓灰质炎病毒型内鉴定的术语和定义、样品采集与处理、检测方法、结果分析及报告要求。本文件适用于医疗卫生机构开展脊髓灰质炎病毒型内鉴定及相关研究工作。
Title：Procedures for Intratypic Differentiation of Poliovirus
中国标准分类号：C46
国际标准分类号：11.020

《DB65/T 4679-2023 脊髓灰质炎病毒型内鉴定规程》是一项新疆维吾尔自治区地方标准，于2023年正式发布实施。该标准为脊髓灰质炎病毒的型内鉴定提供了科学、规范的技术依据，对于保障公共卫生安全具有重要意义。

标准中最重要的条文之一是关于样本采集的要求。标准明确指出，样本应从疑似感染病例或环境监测点采集，包括粪便、咽拭子等生物样本。采集时需使用无菌容器，并在低温条件下保存和运输，以确保样本的完整性和检测准确性。这一要求直接关系到后续实验结果的真实性和可靠性。

另一个关键条文涉及病毒核酸提取方法的选择。标准推荐采用商业化试剂盒进行RNA提取，同时强调操作人员必须经过专业培训，严格遵守操作规程，避免污染。核酸提取的质量直接影响到下游PCR扩增反应的效果，因此这一环节至关重要。

标准还详细规定了实时荧光定量PCR技术的具体参数设置。例如，引物和探针的设计原则，扩增体系的组成比例，以及循环数的设定等。这些参数的选择需要基于病毒基因组的特点来确定，以保证检测的灵敏度和特异性达到最佳状态。

此外，标准还对结果分析与报告做出了明确规定。要求将检测结果与阳性对照、阴性对照及空白对照进行比较，通过Ct值判断是否存在目标病毒核酸。如果发现阳性结果，还需进一步通过序列测定等方式确认病毒的具体亚型。

最后，标准特别强调了实验室质量控制的重要性。要求定期开展内部质控和外部质控，确保检测过程始终处于受控状态。同时，还要求建立完整的记录档案，以便追溯整个检测流程，提高数据的可信度和可重复性。

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