THBIQA 0003.6-2024 食品中常见高组胺鱼源性成分检测方法 第6部分：鲣鱼 实时荧光 PCR法

THBIQA 0003.6-2024《食品中常见高组胺鱼源性成分检测方法 第6部分：鲣鱼 实时荧光PCR法》相较于旧版标准，在灵敏度和特异性方面有显著提升。这里以“样品前处理步骤”这一关键环节为例，详细解读其在实际应用中的具体操作。

根据新标准的规定，样品前处理需严格遵循以下流程：首先将新鲜或冷冻的鲣鱼样本进行均质化处理，确保组织均匀分布。接着使用生理盐水按质量比1:5的比例稀释样本，充分混匀后静置10分钟。然后取上清液，通过离心机以8000g转速离心10分钟，收集上清液用于后续DNA提取。值得注意的是，与旧版标准相比，新版增加了“低温保存”这一环节——即在每个步骤完成后，均需将样本置于-20℃条件下短暂停留至少5分钟，以此减少酶活性对结果的影响。

实际操作时，应特别关注以下几个要点：一是均质化过程中选用适当的设备和参数，避免因过度研磨导致DNA降解；二是离心速度和时间的选择要精确，过高或过低都会影响上清液的质量；三是严格按照低温保存要求执行，特别是在炎热季节或无恒温设备的情况下尤为重要。

此外，为保证实验结果的准确性，还需注意以下几点：操作人员需经过专业培训并熟悉整个流程；所有试剂和耗材必须处于有效期内且未受污染；实验环境应保持清洁，防止交叉污染。通过以上细致的操作，可以最大限度地提高检测方法的灵敏度和特异性，从而更准确地判断鲣鱼成分的存在与否。