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摘要:本文件规定了食品中常见高组胺鱼源性成分(日本鲭)的实时荧光PCR检测方法的技术要求、操作步骤及结果判定。本文件适用于食品中日本鲭成分的定性检测。
Title:Detection Method of Histamine-forming Fish Components in Food - Part 2: Real-time Fluorescent PCR Method for Japanese Mackerel
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:67.200.99
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拓展解读
THBIQA 0003.2-2024《食品中常见高组胺鱼源性成分检测方法 第2部分 日本鲭 实时荧光PCR法》是用于检测食品中日本鲭鱼源性成分的重要标准。本文以“新旧版本标准中提取试剂的选择与应用”为主题,对这一关键差异进行详细解读。
在THBIQA 0003.2-2018版中,推荐使用传统酚/氯仿提取试剂来提取DNA。然而,在2024版中,标准更新为优先采用商业化核酸提取试剂盒。这种变化主要基于以下几个方面的考量:
首先,商业化试剂盒的操作更为简便快捷。例如,某品牌的核酸提取试剂盒仅需30分钟即可完成整个提取过程,而传统方法往往需要数小时。这不仅节省了时间,还降低了操作人员的工作强度。
其次,试剂盒提供的稳定性和重复性更高。传统方法容易受到操作者技术水平的影响,导致结果波动较大。而试剂盒经过严格的质量控制,能够保证每次实验的一致性,这对于需要长期监测的食品安全检测尤为重要。
再者,试剂盒减少了有害化学物质的使用量。酚/氯仿等试剂具有毒性且处理不当可能造成环境污染,而现代试剂盒通常采用环保型材料,并提供安全的废液处理方案。
实际应用中,若选择使用试剂盒,则应严格按照说明书操作。以某品牌试剂盒为例,在提取日本鲭鱼样本DNA时,首先将样品研磨成细粉,然后加入裂解液和蛋白酶K进行初步处理。接着将混合物转移至吸附柱内,在特定条件下离心,最后通过洗脱获得纯净的DNA溶液。在整个过程中,确保所有步骤都符合标准要求,才能保证最终检测结果的准确性。
总之,从酚/氯仿到商业化试剂盒的转变,体现了技术进步带来的便利与可靠性提升。在实际工作中,正确选用并熟练掌握试剂盒的使用方法,对于提高检测效率、保障食品安全具有重要意义。