DB15T 2788—2022 向日葵根尖染色体制片和核型分析技术规程

向日葵作为重要的油料作物，其遗传研究对育种工作具有重要意义。DB15/T 2788—2022《向日葵根尖染色体制片和核型分析技术规程》为开展向日葵染色体研究提供了标准化的技术指导。以下选取部分关键条款进行深度解读。

首先，该标准规定了实验材料的采集应在植物生长旺盛期进行，一般选择在上午9:00-11:00之间取材。这一时间段细胞分裂活跃，能够获得更多的分裂相。同时要求选用健康无病虫害的植株，确保制片质量。

在预处理环节，标准指出应使用卡诺固定液固定根尖组织，固定时间为24小时。适当的固定时间可以保证细胞形态完整，有利于后续操作。预处理后需将根尖转入70%乙醇中保存备用，以便随时取用。

对于染色体制片，标准推荐采用低渗-固定-滴片法。具体参数为低渗处理37℃下30分钟，固定液使用甲醇冰醋酸体积比3:1的混合液。滴片时要掌握好温度和角度，确保细胞均匀分散于载玻片上形成单层细胞。

在显微镜观察阶段，标准强调应使用100倍物镜初步定位分裂相，然后换用1000倍物镜进行详细观察。每个样本至少计数50个分裂相，以提高数据可靠性。对于核型分析，要求测量每条染色体的长臂、短臂长度及臂比，绘制核型图。

此外，标准还提出了质量控制措施。如制片过程中要定期检查显微镜光源亮度，避免因光线不足影响观察效果。制片完成后应对结果进行复核，确保数据准确无误。

总之，DB15/T 2788—2022为向日葵染色体研究提供了全面的技术规范，通过严格遵循这些操作步骤，可以有效提高制片质量和核型分析的准确性，为向日葵遗传育种研究奠定坚实基础。