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资源简介
摘要:本文件规定了向日葵总DNA快速提取及检测的技术要求、操作步骤、质量控制等内容。本文件适用于向日葵品种鉴定、遗传多样性分析及分子育种等相关研究中的DNA提取与检测工作。
Title:Technical Regulations for Rapid Extraction and Detection of Total DNA from Sunflower
中国标准分类号:B 46
国际标准分类号:65.020 -
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拓展解读
向日葵总DNA快速提取及检测技术规程(DB15/T 2734—2022)是内蒙古自治区发布的关于向日葵DNA提取和检测的重要标准。该标准为向日葵遗传育种、病虫害防治以及品质分析等领域提供了规范化操作流程和技术指导。以下将对标准中的关键条文进行详细解读。
### 样品采集与处理
标准中明确规定,样品应选取向日葵植株的新鲜叶片或种子作为提取材料。采集时需注意避免污染,并在低温条件下保存以保持DNA的完整性。样品处理过程中要求使用无菌工具研磨至细腻粉末状,这是为了确保后续提取步骤能够充分释放细胞内的DNA。
### 提取方法
标准推荐采用CTAB法进行总DNA的快速提取。具体操作包括:首先将预处理好的样品加入含有CTAB缓冲液的离心管中,在60-65℃水浴锅中温浴15-20分钟;接着加入氯仿-异戊醇混合液振荡混匀后离心分离;最后收集上清液并加入冷异丙醇沉淀DNA。这一系列步骤旨在有效去除蛋白质、多糖等杂质,获得高质量的DNA样本。
### 检测指标
根据标准要求,提取后的DNA需满足以下条件才能用于进一步实验:浓度不低于50ng/μL,OD260/OD280值介于1.8-2.0之间,表明纯度较高;同时OD260/OD230值应大于2.0,这反映了良好的化学纯净度。这些参数直接关系到后续PCR扩增或其他分子生物学实验的成功率。
### 注意事项
标准还特别强调了实验过程中的注意事项,比如所有使用的试剂和耗材都必须经过严格的灭菌处理,防止外源性DNA污染;此外,在整个操作过程中要尽量缩短暴露时间,减少紫外线照射,从而最大限度地保护DNA不被降解。
综上所述,《向日葵总DNA快速提取及检测技术规程》(DB15/T 2734—2022)不仅提供了详细的实验步骤,而且涵盖了从样品准备到最终检测结果判断的全过程,对于从事相关研究工作的科研人员来说具有极高的实用价值。通过遵循本标准的操作指南,可以显著提高工作效率并保证数据可靠性。
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最后更新时间 2025-06-03