DB51T 2906-2022 猪盖塔病毒分离与鉴定技术规范

摘要：本文件规定了猪盖塔病毒分离与鉴定的技术要求，包括样品采集、病毒分离、分子生物学鉴定和血清学鉴定等方法。本文件适用于猪盖塔病毒的实验室诊断及相关研究工作。
Title：Technical Specification for Isolation and Identification of Porcine Gata Virus
中国标准分类号：B 46
国际标准分类号：65.020.30

DB51/T 2906-2022《猪盖塔病毒分离与鉴定技术规范》是四川省地方标准，于2022年发布实施。该标准规定了猪盖塔病毒分离、培养、鉴定及保存的技术要求，适用于猪盖塔病毒的实验室研究和诊断工作。

重点条款解读如下：

1. 样品采集：应采集病猪的扁桃体、肺组织等病变部位样本。采样时需使用无菌器械，并尽快送检。样品应在4℃条件下保存不超过48小时，或在-70℃长期保存。

2. 病毒分离：将采集的样品接种到Vero细胞上，37℃培养7天。观察细胞病变情况，出现明显的细胞圆缩、脱落等现象可初步判断为阳性。

3. 鉴定试验：采用荧光定量PCR方法检测病毒核酸。特异性引物序列：正向引物：5'-ATG GCA TGC TGG AGC AAG-3'，反向引物：5'-CTA CTT GGT CTC TGA GGT-3'。反应体系：2×Taq Pro HS Mix 12.5μL，上下游引物各0.5μL，模板DNA 2μL，ddH2O补足至25μL。反应条件：95℃预变性3分钟；95℃变性15秒，60℃退火延伸45秒，共40个循环。

4. 结果判定：Ct值≤35为阳性，Ct值>35且≤40为可疑，Ct值>40为阴性。每个检测批次需设置阳性对照和阴性对照。

5. 质量控制：实验室应定期进行内部质控和外部质控。每次实验前应对仪器设备进行校准和维护，确保检测结果准确可靠。

6. 安全防护：实验人员应穿戴全套个人防护装备，包括防护服、手套、口罩和护目镜。实验废弃物应按生物安全相关规定进行处理，防止污染环境。

登陆阅读剩余内容

登陆 注册