DB42T 1864.1-2022 家禽疫病诊断技术规程 第1部分：家禽主要肿瘤病病原鉴别

DB42/T 1864.1-2022《家禽疫病诊断技术规程 第1部分：家禽主要肿瘤病病原鉴别》是一项湖北省地方标准，为家禽主要肿瘤病的病原鉴别提供了系统的检测方法和技术要求。以下将选取标准中的重要条文进行详细解读。

标准适用范围

该标准适用于家禽养殖过程中对主要肿瘤性疾病病原的实验室鉴别诊断。这包括了鸡、鸭等常见家禽种类中常见的肿瘤性疾病，如马立克氏病、网状内皮组织增殖病等。

样品采集与保存

标准明确指出，样品采集应在无菌条件下进行，以确保检测结果的准确性。对于血液样本，应使用EDTA抗凝管收集，并在4℃条件下保存不超过24小时；而对于组织样本，则需立即置于含有甲醛的固定液中固定，以便后续病理学检查。

检测方法

# 病毒分离与鉴定

病毒分离是诊断肿瘤性疾病的重要手段之一。根据标准，病毒分离可采用鸡胚接种法或细胞培养法。鸡胚接种时，选择9-11日龄的SPF鸡胚，将样品接种于卵黄囊内，观察7天后是否有典型病变出现。而细胞培养则需要选择敏感细胞系（如DF-1细胞），将样品接种后定期观察细胞形态变化及CPE（细胞病变效应）。

# 分子生物学检测

分子生物学技术的应用大大提高了病原检测的灵敏度和特异性。标准推荐使用PCR或实时荧光定量PCR方法来检测特定病毒DNA/RNA的存在。例如，马立克氏病病毒(MDV)的检测可以通过设计特异性引物扩增MDV基因片段实现。此外，还可以利用环介导等温扩增(LAMP)技术进行快速筛查。

# 血清学检测

血清学检测主要用于抗体水平的测定。标准建议采用ELISA方法检测家禽血清中针对特定病原体的抗体滴度。例如，在马立克氏病的诊断中，通过检测MDV特异性抗体可以辅助判断家禽是否感染该疾病。

结果判定

最终结果的判定应当综合考虑多种检测手段的结果。如果至少两种独立的检测方法均显示阳性，则可以判定为阳性病例；若仅有一种方法呈阳性，则需进一步验证；若所有检测均为阴性，则可初步排除该病原感染。

注意事项

执行本标准时应注意操作规范性和安全性，避免交叉污染。同时，实验室工作人员必须经过专业培训并持有相应资格证书才能上岗操作。

以上是对DB42/T 1864.1-2022《家禽疫病诊断技术规程 第1部分：家禽主要肿瘤病病原鉴别》部分内容的重点解读。这项标准为家禽养殖业提供了科学有效的技术支持，有助于提高家禽健康管理水平。