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资源简介
摘要:本文件规定了辣椒褪绿病毒(Pepino Mosaic Virus,简称 PepMV)的RT-PCR 检测方法的技术要求,包括样品采集、RNA 提取、RT-PCR 扩增及结果判定等内容。本文件适用于辣椒作物中辣椒褪绿病毒的检测与鉴定。
Title:Technical Regulations for Detection of Pepper Chlorosis Virus in Vegetable Crops - Chili
中国标准分类号:B 46
国际标准分类号:65.020.20 -
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拓展解读
DB43/T 1824-2020《蔬菜作物辣椒褪绿病毒检测技术规程》是由湖南省市场监督管理局批准发布的,主要用于指导辣椒褪绿病毒的检测工作。以下是一些重要条文的详细解读:
1. **适用范围**:该标准适用于辣椒褪绿病毒的检测,涵盖了从样本采集到结果分析的全过程。明确了标准的应用领域和限制条件。
2. **术语和定义**:标准中对“辣椒褪绿病毒”、“PCR扩增”等专业术语进行了明确界定,确保检测过程中使用的术语一致且准确,避免因理解差异导致的操作偏差。
3. **样本采集与处理**:
- 样本应在植株表现出典型症状时采集。
- 采集部位包括叶片、茎部或果实,要求新鲜且无污染。
- 样本采集后需立即放入密封袋中,并尽快送至实验室进行处理。
4. **核酸提取**:采用适当的试剂盒或方法提取RNA,确保提取效率和纯度符合后续实验需求。强调了操作环境的清洁度及个人防护的重要性。
5. **RT-PCR检测**:
- 使用特异性引物进行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)。
- 设立阳性对照、阴性对照以及空白对照以验证实验结果的有效性。
- 对于扩增产物,建议使用琼脂糖凝胶电泳法进行初步判断,并结合测序技术确认具体病毒类型。
6. **结果判定**:根据RT-PCR扩增曲线及电泳图谱判断样品是否感染辣椒褪绿病毒。阳性结果表现为明显的扩增峰或清晰可见的目标条带;而阴性则相反。
7. **报告撰写**:检测完成后应及时出具正式报告,内容应包含但不限于送检单位信息、采样时间地点、检测方法、实验过程记录、最终结论等基本信息。
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最后更新时间 2025-06-03