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摘要:本文件规定了H7亚型禽流感病毒胶体金试纸条抗原检测方法的原理、试剂和材料、仪器设备、样品处理、检测步骤、结果判定及注意事项。本文件适用于H7亚型禽流感病毒的快速抗原检测。
Title:Detection Method of H7 Subtype Avian Influenza Virus Antigen by Colloidal Gold Test Strip
中国标准分类号:C46
国际标准分类号:11.020
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拓展解读
DB42/T 1590-2020《H7亚型禽流感病毒胶体金试纸条抗原检测方法》是一项湖北省地方标准,规定了利用胶体金免疫层析技术快速检测H7亚型禽流感病毒抗原的方法。以下对标准中的重要条文进行详细解读:
【范围】
本标准适用于H7亚型禽流感病毒抗原的现场快速检测。该方法具有操作简便、结果直观的特点,特别适合基层兽医实验室使用。
【原理】
胶体金试纸条采用免疫层析原理,通过特异性单克隆抗体识别H7亚型禽流感病毒核蛋白。当样本中含有目标抗原时,会与试纸条上的胶体金标记抗体形成复合物,并沿硝酸纤维素膜移动至检测线处显色。
【主要试剂及材料】
包括试纸条、样品稀释液、移液器等。试纸条由样品垫、标记垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组成,其中硝酸纤维素膜上固定有抗H7亚型禽流感病毒单克隆抗体。
【操作步骤】
1. 样品制备:取适量待检组织或分泌物,加入样品稀释液充分混匀。
2. 滴加样品:将稀释后的样品滴加到试纸条样品孔中。
3. 结果判定:10分钟内观察结果,出现两条红线为阳性,仅质控线出现为阴性。
【结果判断】
阳性反应表现为检测线和质控线均显色,表明样品中含有H7亚型禽流感病毒抗原。阴性反应仅质控线显色。无任何显色表示试验无效,需重新检测。
【注意事项】
1. 试纸条应在有效期内使用。
2. 操作环境温度应控制在15℃-30℃之间。
3. 样品采集后应尽快检测,保存时间不超过2小时。
【性能指标】
灵敏度:最低可检测浓度为1 ng/mL。
特异性:对其他常见禽类病原体无交叉反应。
重复性:批间变异系数不大于15%。
以上是对DB42/T 1590-2020标准中关键内容的深度解析,该标准为H7亚型禽流感病毒的快速筛查提供了科学依据和技术支持。