DB15T 2024—2020 牛和水牛源性成分同步检测方法 实时荧光PCR法

DB15/T 2024—2020《牛和水牛源性成分同步检测方法 实时荧光PCR法》是一项内蒙古自治区的地方标准，规定了利用实时荧光PCR技术检测食品及其原料中牛和水牛源性成分的方法。这项标准适用于牛、水牛源性成分的定性检测。

标准中的关键内容包括：

1. 范围：明确了该标准适用于检测食品及原料中的牛和水牛源性成分，是定性检测方法。

2. 规范性引用文件：列出了与本标准相关的其他标准文件，这些文件为标准提供了必要的技术支持和参考依据。

3. 术语和定义：给出了“牛”、“水牛”、“DNA”等基本概念的定义，确保在执行过程中各方对术语有统一的理解。

4. 原理：描述了通过实时荧光PCR技术扩增特定DNA序列，利用荧光信号监测反应过程，并根据标准曲线判断样品是否含有目标物种的DNA。

5. 试剂与材料：详细说明了实验所需的各种试剂、耗材以及设备要求，如DNA提取试剂盒、引物探针混合物等。

6. 仪器设备：列出了实施检测所需的仪器设备，比如实时荧光定量PCR仪等。

7. 样品采集与保存：强调了样品采集的重要性，规定了如何正确采集样本以保证检测结果的有效性，并介绍了适当的保存条件。

8. 核酸提取：具体步骤涵盖了从样品中提取DNA的过程，包括但不限于组织处理、裂解细胞、纯化DNA等环节。

9. PCR扩增：详细描述了PCR反应体系的组成及反应条件设置，例如退火温度、循环次数等参数的选择。

10. 结果判定：基于Ct值（循环阈值）来判断样品中是否存在牛或水牛的特异性DNA片段，同时提供了一个阳性对照和阴性对照来进行验证。

11. 质量控制：提出了在整个检测流程中需要采取的质量控制措施，以确保数据的真实性和可靠性。

12. 安全注意事项：提醒操作人员注意生物安全问题，比如避免交叉污染、妥善处置废弃物等。

此标准不仅为实验室技术人员提供了详细的指导手册，还促进了食品安全领域的标准化进程，对于保障消费者权益具有重要意义。