DB34T 3649-2020 水产品中磺胺类药物残留量的测定 酶联免疫吸附法

摘要：本文件规定了水产品中磺胺类药物残留量的酶联免疫吸附测定方法，包括原理、试剂和材料、仪器设备、样品制备与处理、测定步骤、结果计算及精密度要求。本文件适用于鱼、虾等水产品中磺胺类药物残留量的测定。
Title：Determination of sulfonamide residues in aquatic products - Enzyme-linked immunosorbent assay
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：67.200.30

DB34/T 3649-2020 是一项关于水产品中磺胺类药物残留量测定的安徽省地方标准，采用酶联免疫吸附法（ELISA）进行检测。以下是对该标准的重要条文进行的详细解读。

### 范围

本标准规定了使用酶联免疫吸附法测定水产品中磺胺类药物残留量的技术要求和操作步骤。适用于鱼类、虾蟹类等水产品的磺胺类药物残留检测。

### 原理

酶联免疫吸附法基于抗原抗体特异性结合的原理。样品中的磺胺类药物与酶标抗原竞争性地与抗体结合，通过酶促反应显色后，利用分光光度计测量吸光度值来判断样品中磺胺类药物的含量。

### 样品制备

样品应经过均质处理并加入提取溶剂，如乙腈或甲醇，以有效提取磺胺类药物。提取液需经离心分离杂质，并用正己烷洗涤去除脂溶性干扰物。

### 试剂与材料

试剂的选择直接影响检测结果的准确性。标准中明确指出，所使用的酶标板、抗体及底物都必须符合相关质量要求，且应在有效期内使用。

### 操作步骤

1. 样品处理：按照规定的比例添加提取剂，充分混匀后静置。

2. 稀释与校准：将样品稀释至适当浓度，并准备一系列已知浓度的标准溶液。

3. 包被与封闭：将抗体包被于酶标板上，然后进行封闭处理以减少非特异性吸附。

4. 加样孵育：分别加入不同浓度的标准液和样品溶液，设定适宜温度条件下孵育。

5. 洗涤：用缓冲液多次清洗酶标板，去除未结合物质。

6. 显色反应：加入显色剂后避光孵育一定时间。

7. 终止反应：加入终止液停止显色反应。

8. 测定吸光度：在特定波长下测量各孔的吸光度值。

### 结果计算

依据标准曲线方程计算出样品中磺胺类药物的实际浓度。当样品吸光度低于最低检测限时，则判定为阴性；高于此限则需进一步确认实验。

### 注意事项

- 实验过程中要严格控制温度、时间和试剂用量等因素。

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